實(shí)驗(yàn)服務(wù)
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PCR擴(kuò)增
? 服務(wù)介紹
PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）是一種分子生物學(xué)技術(shù)，它可以在體外大量擴(kuò)增特定的DNA片段。這項(xiàng)技術(shù)因其高靈敏度、高特異性、快速性和對(duì)樣品起始量要求低等優(yōu)點(diǎn)，被廣泛應(yīng)用于臨床診斷、病原微生物診斷、基因工程研究和技術(shù)開發(fā)等領(lǐng)域。
發(fā)貨標(biāo)準(zhǔn)：
①PCR檢測(cè)實(shí)驗(yàn)附贈(zèng)引物；
②PCR檢測(cè)原始數(shù)據(jù)、完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告和數(shù)據(jù)分析；
客戶提供：
①PCR樣品：組織應(yīng)不少于100mg；細(xì)胞106-107個(gè)細(xì)胞；cDNA不少于30μg；
細(xì)胞或組織裂解液總RNA濃度須大于1mg/mL，單個(gè)樣品不少于50μL；
②組織需液氮速凍，細(xì)胞收獲后加入Trizol保存于-80°C；
③樣品用干冰寄送，避免各類污染和反復(fù)凍融。
? 實(shí)驗(yàn)步驟
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①PCR檢測(cè)實(shí)驗(yàn)附贈(zèng)引物；
②PCR檢測(cè)原始數(shù)據(jù)、完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告和數(shù)據(jù)分析；
客戶提供：
①PCR樣品：組織應(yīng)不少于100mg；細(xì)胞106-107個(gè)細(xì)胞；cDNA不少于30μg；
細(xì)胞或組織裂解液總RNA濃度須大于1mg/mL，單個(gè)樣品不少于50μL；
②組織需液氮速凍，細(xì)胞收獲后加入Trizol保存于-80°C；
③樣品用干冰寄送，避免各類污染和反復(fù)凍融。
? 實(shí)驗(yàn)步驟
- 樣品準(zhǔn)備：收集待檢測(cè)的核酸樣品，如血液、組織、唾液等。
- 引物設(shè)計(jì)：設(shè)計(jì)合適的引物序列，通常包括前向引物和反向引物，用于擴(kuò)增目標(biāo)序列特定區(qū)域。
- PCR反應(yīng)體系準(zhǔn)備：準(zhǔn)備PCR反應(yīng)體系，包括模板DNA、引物、dNTP、緩沖溶液、聚合酶等。確保反應(yīng)體系配比準(zhǔn)確。
- PCR擴(kuò)增：將反應(yīng)體系置于熱循環(huán)儀中，進(jìn)行PCR擴(kuò)增。熱循環(huán)包括一系列的溫度變化步驟，如變性、退火、延伸等
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